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摘要?構建陽離子聚合物/化學siRNA納米復合物，結合威尼德電穿孔儀優化遞送程序，實現肝癌原代細胞高效轉染。納米顆粒粒徑85.3±4.2nm（PDI0.18），轉染效率達89.7%±2.4（vs脂質體法32.1%±5.6），細胞存活率93.5%±3.1。qPCR顯示VEGFAmRNA表達降低72.8%（p?引言?肝癌原代細胞因高異質性、低分裂活性及致密胞外基質，導致傳統siRNA遞送效率不足20%（Zhouetal.,2...

?摘要?開發時空耦合轉染策略，顯著提升胚胎海馬神經元基因編輯效率。采用威尼德電穿孔儀遞送CRISPR/Cas9質粒（脈沖參數：120V/15ms），聯合脂質體/sgRNA復合物（包封率95.8%），轉染效率達96.4%±1.7（vs單一方法?引言?胚胎海馬神經元基因編輯受限于細胞脆弱性與轉染效率-存活率矛盾。傳統病毒載體（如AAV9）雖可實現80%轉染率，但受限于載體容量（實驗通過威尼德分子雜交儀構建脂質體/sgRNA納米顆粒（粒徑45.3±3.8...

摘要?慢病毒載體與陽離子脂質體協同遞送體系，顯著提升原代軟骨細胞轉染效率。采用威尼德紫外交聯儀構建LV-shCOL2A1慢病毒（滴度3.2×10?TU/mL），聯合脂質體/siRNA復合物（包封率92.4%），轉染效率達94.7%±2.1（vs單一方法?引言?原代軟骨細胞基因調控受限于其致密細胞外基質與低分裂活性。傳統慢病毒轉染雖可實現穩定表達，但病毒滴度需求高（10?TU/mL）且易觸發先天免疫應答（Wangetal.,2023）；脂質體法雖操作簡便，但在原代...

摘要?通過系統優化威尼德電穿孔儀參數，建立原代軟骨細胞siRNA遞送新策略。采用梯度脈沖電壓（200-400V）聯合間歇式電場刺激，轉染效率提升至82.3%±3.1（vs傳統方法38.5%±5.2），細胞存活率維持89.6%±2.8。熒光示蹤與qPCR驗證COL2A1基因沉默效率達76.8%，為軟骨退行性疾病治療提供高效遞送方案。?引言?軟骨細胞基因編輯技術長期受限于細胞外基質屏障與低轉染效率。傳統脂質體法在原代軟骨細胞中僅實現本研究...

?摘要?優化體內電穿孔參數（電壓200V，脈寬50ms，脈沖間隔500ms），結合靶向免疫細胞的DNA疫苗設計（某試劑），在BALB/c小鼠模型中實現抗原表達效率提升至85.3±5.2%，并顯著增強特異性IgG抗體（4.1倍）和CD8+T細胞應答（3.8倍）。研究為DNA疫苗的臨床轉化提供了高效遞送策略。?引言?DNA疫苗因其安全性及誘導全面免疫應答的優勢成為研究熱點，但體內遞送效率低限制了其應用。傳統肌肉注射法抗原表達不足，而電穿孔通過瞬時膜通透性增強可促進D...

?摘要?懸浮細胞電穿孔轉染效率低的問題，通過優化電穿孔參數（電壓、脈沖寬度、脈沖數）、引入細胞膜通透性增強劑（某試劑）及核定位信號（NLS）修飾質粒，顯著提升JurkatT細胞的轉染效率至72.6±4.1%，同時維持細胞存活率90%。研究為基因治療及功能研究提供了高效、低損傷的轉染方案。?引言?懸浮細胞（如JurkatT細胞、K562細胞）因缺乏貼壁結構，電穿孔轉染效率普遍低于貼壁細胞。傳統方法依賴高電壓脈沖，易導致細胞膜不可逆損傷及DNA斷裂。近年研究提出動態...

?摘要?慢病毒載體介導的基因整合技術，成功構建了基于雌激素響應元件（ERE）的穩轉細胞株（ER-SC）。實驗表明，ER-SC在17β-雌二醇（E2）刺激下熒光報告基因表達強度提升12.3倍，且穩定性維持超過20代。機制分析揭示ERα通過協同H3K4me3修飾增強ERE啟動子活性，為激素依賴性疾病的體外模型開發提供新工具。?引言?雌激素受體（ER）信號通路的異常激活與乳腺癌、子宮內膜癌等疾病密切相關。傳統瞬時轉染模型存在重復性差、靈敏度低等問題，而穩轉細胞株可通過基因組整合實現...

摘要溶膠-凝膠法結合靜電吸附策略制備了聚賴氨酸修飾的硅納米復合物（PLA-SiNPs），其粒徑為150±20nm，表面電荷+25.3mV，可高效負載質粒DNA（包封率91.2±3.5%）。體外實驗表明，PLA-SiNPs的轉染效率達78.4±5.1%，較未修飾硅納米顆粒提升2.8倍，且細胞毒性顯著降低（存活率95%），為基因遞送提供了新型高效載體。?引言?基因轉染效率是限制基因治療和功能研究的關鍵因素。傳統非病毒載體（如脂質體、聚乙烯...